收藏|農(nóng)藥殘留檢測的主流檢測技術(shù)大盤點

農(nóng)藥殘留關(guān)系著食品安全，是重要的食品檢測的項目，現(xiàn)階段食品中農(nóng)殘的檢測方法多種多樣，除了最常用的光光度法、極譜法、原子吸收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、同位素標記法、核磁共振波譜法、色質(zhì)聯(lián)用法外，還有波譜、毛細管電泳、免疫分析和酶抑制法化學(xué)法、生物法等多種檢測技術(shù)。

什么是農(nóng)藥殘留

農(nóng)藥殘留（Pesticideresidues)， 是農(nóng)藥使用后一個時期內(nèi)沒有被分解而殘留于生物體、收獲物、土壤、水體、大氣中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、 降解物和雜質(zhì)的總稱。

施用于作物上的農(nóng)藥，其中一部分附著于作物上，一部分散落在土壤、大氣和水等環(huán)境中，環(huán)境殘存的農(nóng)藥中的一部分又會被植物吸收。殘留農(nóng)藥直接通過植物果實或水、大氣到達人、畜體內(nèi)，或通過環(huán)境、食物鏈最終傳遞給人、畜。農(nóng)殘剝離器可以降解 水果蔬菜表面的農(nóng)藥殘留。

01 農(nóng)藥殘留的生物測定技術(shù)（ABBA）

利用指示生物的生理生化反應(yīng)來判斷農(nóng)藥殘留及其污染情況。例如，可以用實驗室養(yǎng)的敏感性家蠅為測定材料，以其接觸待測樣品后的中毒程度來表示該樣品中的殺蟲劑殘留；以病菌生長受抑制的程度來檢測殺菌劑的殘留，以玉米或其它指示植物根長受抑制的程度來檢測土壤中磺酰脲類除草劑殘留等。該方法無需對樣品前處理比較簡單快速或無需進行前處理，但對指示生物要求較高，測定結(jié)果不能確定農(nóng)藥品種，并且可能出現(xiàn)假陽性或假陰性的情況，該方法可作為快速檢驗方法用于農(nóng)產(chǎn)品引起中毒或在現(xiàn)場使用。

02農(nóng)藥殘留的理化檢測

用于農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測方法有分光光度法、極譜法、原子吸收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、同位素標記法、核磁共振波譜法、色質(zhì)聯(lián)用法等。自二十世紀九十年代以來，現(xiàn)代化學(xué)分析技術(shù)日新月異，許多新技術(shù)已進入實用階段，如毛細管電脈儀技術(shù)（CZE），色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（GC-MS、HPLC-MS）超臨界流體色譜技術(shù)（SFC），直接光譜分析技術(shù)等。這些新技術(shù)的應(yīng)用，大大提高農(nóng)藥殘留分析的靈敏度，簡化分析步驟，提高了分析效率。但是，這些分析方法有的靈敏度不高，如分光光度法、薄層層析法等。有的需要昂貴的儀器，如色質(zhì)聯(lián)用法、核磁共振波譜法等。還有的需要特殊的設(shè)備，如同位素標記法等。因此，目前，普遍采用的還是氣相色譜法和液相色譜法，它們具有簡便、快速、靈敏以及穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好，線性范圍寬、耗資低等優(yōu)點。

（1）氣相色譜法（GC）

采用氣體作流動相的色譜法，用于揮發(fā)性農(nóng)藥的檢測，具有高選擇性、高分離效能、高靈敏度、快速和特點，是農(nóng)藥殘留量檢測最常用的方法之一，目前用于農(nóng)藥殘留檢測的檢測器主要有電子捕獲檢測器（ECD）、微池電子捕獲檢測器（u-ECD）、火焰光度檢測器（FPD）、脈沖火焰光度檢測器（P-FPD）、氮磷檢測器（NPD）等。

（2）液相色譜法（HPLC）

采用液體作流動相的一種色譜法，它可以分離檢測極性強、分子量大及離子型農(nóng)藥，可用于不易氣化或受熱易分解的農(nóng)藥的檢測。近年來，采用新型高效固定相、高壓泵和高靈敏度的檢測器，柱前和柱后衍生技術(shù)、以及計算機聯(lián)用等，大大提高了檢測效率、靈敏度、速度和操作自動化程度。目前用于農(nóng)藥殘留檢測最多是紫外吸收檢測器（UV）、兩極管陣列檢測器（DAD）和熒光檢測器（FLD）。

（3）色質(zhì)聯(lián)用法（GC-MS，HPLC-MS）

氣相或液相與質(zhì)譜聯(lián)用，它既具備了色譜的高分離效能優(yōu)點，而且具備了質(zhì)譜準確鑒定化合物結(jié)構(gòu)的特點，可同時達到定性、定量的檢測目的，特別適合于農(nóng)藥代謝物、降解物的檢測和多殘留檢測等，不過此法需要貴重儀器且操作繁雜困難，不適合于經(jīng)常性的檢測。一般可用來做最后的確認工作。

（4）超臨界流體色譜（SFC）

是以超臨界流體作為流動相的色譜體系，超臨界流體是指物質(zhì)處于臨界溫度和臨界壓力時的狀態(tài)，介于氣、液態(tài)之間，兼有氣體和液體的某些物理特性，因此，超臨界流體色譜既有氣譜的快速、高效、靈敏的特點，又有能檢測對熱不穩(wěn)定和大分子化合物的液譜的特點。

（5）毛細管電泳法（CE）

該方法是利用毛細管及高電壓（15-30KW）分離各種農(nóng)藥殘留物，非常適合于一些難于用傳統(tǒng)色譜法分離的離子化樣品的分離和分析，比HPLC有高10-1000倍的分析能力，而且所需之緩沖液具有不危害環(huán)境之特點，在短時間（30分鐘）內(nèi)就可以完成定性及定量分析。

03常用農(nóng)藥殘留的快速檢測方法

（1）酶抑制法：

有機磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥共為神經(jīng)系統(tǒng)乙酰膽堿脂酶抑制物，因此可以利用農(nóng)藥靶標酶-乙酰膽用堿酯酶（AChE）受抑制的程度來檢測有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。該方法目前已開發(fā)出了相應(yīng)的各種速測卡和速測儀。該方法檢測時，蔬菜中的水份、碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂等物質(zhì)不會對農(nóng)藥殘留物的檢測造成干擾，不必進行分離去雜，節(jié)省了大量預(yù)處理時間，從而能達到快速檢測的目的，因此該方法具有快速方便、前處理簡單、無需儀器或儀器相對簡單，適用于現(xiàn)場的定性和半定量測定，目前的農(nóng)藥殘留快速檢測就是用了該方法，已上升為農(nóng)業(yè)部行業(yè)標準。但該方法只能用于測定有機磷和氨基甲酸酯類殺蟲劑，其靈敏度和所使用的酶、顯色反應(yīng)時間和溫度密切相關(guān)，經(jīng)酶法檢測出陽性后，需用標準儀器檢驗方法進一步檢測，以鑒定殘留農(nóng)藥品種及準確殘留量。

農(nóng)藥殘留檢測儀HW-SJ12NC采用酶抑制率法，根據(jù)國家標準GB/T5009.199-2003農(nóng)業(yè)部標準（NY/T 448-2001）和國家市場監(jiān)督管理總局標準（KJ201710）而專門設(shè)計的儀器，蔬菜農(nóng)藥殘留檢測儀其采用酶抑制原理和光電比色法原理研制而成。可快速檢測出蔬菜、水果、糧食、茶葉以及土壤中有機磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘毒。適用于各級農(nóng)業(yè)檢測中心、食品安全檢測機構(gòu)、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心、市場監(jiān)督管理、農(nóng)貿(mào)市場、衛(wèi)生防疫、環(huán)保、蔬菜生產(chǎn)基地、超市、賓館酒店等領(lǐng)域

（2）免疫分析法：

有放射性免疫分析、酶免疫分析、多組份分析物免疫分析、免疫傳感器分析等。最為常用的是酶聯(lián)免疫法（ELISA法），它主要是以抗原與抗體的特異性、可逆性結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的農(nóng)藥殘留檢測方法。依靠比色來確定農(nóng)藥殘留量。其方法優(yōu)點是特異性強，靈敏度高，快速簡便，可準確定性定量，適用于現(xiàn)場分析；缺點是由于制備抗體較困難，可能會出現(xiàn)假陽性或假陰性現(xiàn)象。

該法利用化學(xué)物質(zhì)在動物體內(nèi)能產(chǎn)生免疫抗體的原理，先將小分子農(nóng)藥化合物與大分子生物物質(zhì)結(jié)合成大分子，做成抗原，并使之在動物體內(nèi)產(chǎn)生抗體，對抗體篩選制成試劑盒，通過抗原與抗體之間發(fā)生的酶聯(lián)免疫反應(yīng)，依靠比色來確定農(nóng)藥殘留，它具有專一性強、靈敏度高、快速、操作簡單等優(yōu)點，試劑盒可廣泛用于現(xiàn)場樣品和大量樣品的快速檢測，可準確定性、定量。其檢測水平可達ng甚至pg級。

ELISA法廣泛應(yīng)用于食品中農(nóng)藥殘留如有機磷農(nóng)藥、有機氯農(nóng)藥、除草劑、氨基甲酸酯類農(nóng)藥、獸藥殘留(如氯霉素)、真菌毒素等的分析檢測上。作為一種快速篩選方法，ELISA法在分析復(fù)雜基體樣品時，因為基體干擾和交聯(lián)反應(yīng)等問題，往往存在假陽性的問題。因此如果需要對樣品進行定量和確證還需要其他的分析方法。

由于受到農(nóng)藥種類多，抗體制備難度大、在不能肯定樣本中的農(nóng)藥殘留種類時檢測有一定的盲目性以及抗體依賴國外進口等影響，酶聯(lián)免疫法的應(yīng)用范圍受到較大的限制，目前，我國市場上酶聯(lián)免疫法成品試劑盒依賴從國外進口。

（3）化學(xué)法—速測靈法（紙片法）

“速測靈”法應(yīng)用的原理是具有強催化作用的金屬離子催化劑，使各類有機磷農(nóng)藥（磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺）在催化作用下水解為磷酸與醇，水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，使顯色劑的紫紅色退去變成無色。主要針對的是有機磷農(nóng)藥的殘留檢測，特別是甲胺磷、對硫磷農(nóng)藥。這種方法采用化學(xué)反應(yīng)原理，避免了通常所使用生化方法（酶法）的缺點（酶的制備、保存以及反應(yīng)需比較嚴格的條件），靈敏度也達到一定的要求。但是此方法主要針對的是甲胺磷、對硫磷等較高毒性的有機磷農(nóng)藥殘留的定性檢測。

農(nóng)藥殘留檢測試劑盒（紙片法）符合國家標準GB/T 5009.199-2003《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》農(nóng)業(yè)部標準（NY/T 448-2001）和市場監(jiān)督管理總局發(fā)布快檢方法KJ 201710《蔬菜中敵百蟲、丙溴磷、滅多威、克百威、 敵敵畏殘留的快速檢測》可廣泛應(yīng)用于各級市場監(jiān)督管理部門、農(nóng)業(yè)系統(tǒng)、食品安全檢測機構(gòu)、農(nóng)貿(mào)市場、農(nóng)批市場、蔬菜生產(chǎn)基地、商超等

(4)膠體金免疫層析法

膠體金免疫層析技術(shù)就是以膠體金為顯色媒介，利用免疫學(xué)中抗原抗體能夠特異性結(jié)合原理，在層析過程中完成這一反應(yīng)，從而達到檢測的目的。膠體金免疫層析技術(shù)的原理是樣品中目標物與膠體金標記的特異性抗體結(jié)合，抑制抗體和檢測線（T線）上偶聯(lián)抗原的免疫反應(yīng)，從而導(dǎo)致檢測線顏色深淺的變化。通過檢測線與控制線（C線）顏色深淺比較，對樣品中目標物進行定性檢測?？蓮V泛應(yīng)用于各級市場監(jiān)督管理部門、農(nóng)業(yè)系統(tǒng)、食品安全檢測機構(gòu)、農(nóng)貿(mào)市場、農(nóng)批市場、蔬菜生產(chǎn)基地、商超等。

膠體金檢測卡結(jié)果判讀：

目測法：

陰性（－）： T 線顯色比C 線深或一致，表明樣品中藥物濃度低于檢測限或不含藥物殘留；

陽性（＋）：T 線顯色比 C 線淺或無顯色，表明樣品中藥物濃度高于檢測限；

無 效 ：未出現(xiàn) C 線，可能操作不當或檢測卡已失效。在此情況下，應(yīng)再次仔細閱讀說明書，并用新的檢測卡重新測試。

儀器判讀：

試劑盒檢測方法為定性比色法，用膠體金免疫層析分析儀檢測時需核對項目法具體操作方法請參考相關(guān)儀器使用說明書

(5)熒光定量法

農(nóng)藥殘留檢測卡(熒光定量法)具有靈敏度高，操作簡便、結(jié)果準確、重復(fù)性好等優(yōu)點，通過熒光免疫定量分析儀判讀，可以給出定量或者定性的檢測結(jié)果，避免人為判讀帶來的誤差。應(yīng)用熒光定量免疫層析技術(shù)，在檢測卡的反應(yīng)區(qū)預(yù)先包被 C 線和 T 線，T 線與 C 線的熒光信號比值和待測樣本中的目標物含量成反比。通過與配套熒光免疫分析儀內(nèi)置的標準曲線對比，可快速簡便準確定量各種蔬菜、糧食谷物、乳品及其制品、食用油、加工食品樣品中藥物殘留的含量

農(nóng)藥殘留檢測卡(熒光定量法)特點：

◇定量檢測：檢測結(jié)果有具體濃度值；無需現(xiàn)場定標，樣品隨到隨檢;

◇靈敏度高：檢測限比傳統(tǒng)膠體金方法高1-3個數(shù)量級，比普通熒光方法高2-5倍;

◇檢測時間短：20分鐘內(nèi)即可出結(jié)果。

◇結(jié)果準確：抗基質(zhì)干擾強，線性范圍廣;

◇操作簡便：樣品前處理簡單，操作簡便，即使非專業(yè)人員也很容易掌握;